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圓筒實(shí)驗(yàn)（cylinder test）主要針對(duì)不對(duì)稱(chēng)中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病，如帕金森病、阿爾茨海默病、腦卒中等，研究大鼠在貼壁站立過(guò)程中前肢的對(duì)稱(chēng)性和使用率。實(shí)驗(yàn)將大鼠置于一個(gè)透明的樹(shù)脂玻璃圓筒中3～10 min，攝像記錄其活動(dòng)情況。圓筒的形狀能夠刺激大鼠用前肢垂直探索筒壁，記錄3 min內(nèi)大鼠后肢站立時(shí)前肢最初承重觸及筒壁的次數(shù)，并分別記錄左、右側(cè)觸及和雙側(cè)觸及的次數(shù)。相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道，大鼠在局灶性腦缺血后，在圓筒實(shí)驗(yàn)中前肢的使用情況具有不對(duì)稱(chēng)性，且在前肢垂直探索筒壁的過(guò)程中，更傾向于使用正常前肢。
實(shí)驗(yàn)方法
實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備
最好在小鼠活躍期（暗循環(huán)）進(jìn)行圓筒測(cè)試。
注意：將所有測(cè)試的小鼠保持在反向光/暗循環(huán)上很方便。
在實(shí)驗(yàn)前一天用防水記號(hào)筆標(biāo)記老鼠的尾巴，這樣可以快速識(shí)別籠中的小鼠，并在測(cè)試前盡量避免高水平的壓力。
在一天中的同一時(shí)間進(jìn)行所有行為評(píng)估。
將圓筒放在桌子或?qū)嶒?yàn)室工作臺(tái)的中心。使用黑色窗簾覆蓋圓柱體的所有側(cè)面，以盡量減少對(duì)老鼠的視覺(jué)干擾。
注意：在圓筒所在的表面上畫(huà)一條線(xiàn)，以確保圓筒可以返回到相同的位置。
在弱光條件下進(jìn)行測(cè)試。黑暗的環(huán)境會(huì)激發(fā)老鼠的探索本能。在我們的動(dòng)物設(shè)施中，我們使用天花板白光作為主要照明源。該光源由調(diào)光開(kāi)關(guān)控制，可在圓柱體上方提供 40 勒克斯。
注意：確保照明條件足以清楚地看到視頻記錄中圓柱體周?chē)那爸褂们闆r。
在測(cè)試前讓老鼠適應(yīng)測(cè)試室至少 30 分鐘。提供與測(cè)試相同的光照條件。讓老鼠不受干擾地休息。
行為分析
開(kāi)始錄像。
用動(dòng)物識(shí)別標(biāo)記測(cè)試卡并記錄 3 秒。
將老鼠放入玻璃圓柱體的中間并啟動(dòng)計(jì)時(shí)器（下圖）。
記錄小鼠 10 分鐘。在測(cè)試結(jié)束時(shí)，立即將鼠標(biāo)放回其家籠。
用肥皂和水清潔氣缸。
用 70% 乙醇噴灑圓筒以去除任何氣味痕跡。
在下一次測(cè)試之前讓玻璃圓筒干燥。
對(duì)所有測(cè)試的小鼠重復(fù)步驟 。?
將所有老鼠送回鼠籠。
數(shù)據(jù)分析
計(jì)算右爪、左爪或雙爪的觸壁次數(shù)（同時(shí)雙爪接觸）；
將數(shù)據(jù)表達(dá)為受損前肢相對(duì)于總接觸的百分比 [(對(duì)側(cè)觸摸)/(同側(cè)觸摸 + 對(duì)側(cè)觸摸) x 100]；
注意事項(xiàng)
玻璃圓筒的大小可能會(huì)根據(jù)小鼠品系的大小而有所不同。更大或更活躍的應(yīng)變可以通過(guò)跳到氣缸的邊緣來(lái)試圖逃脫。在這種情況下，應(yīng)使用更高的氣缸。我們?cè)诒緟f(xié)議中使用的氣缸適用于 C57BL/6 小鼠。
一些研究人員使用放置在圓柱體旁邊的鏡子來(lái)確保在視頻記錄中看到前肢。
在測(cè)試之前不要使小鼠習(xí)慣于氣缸。這可能導(dǎo)致老鼠很少或沒(méi)有探索的傾向。
試驗(yàn)持續(xù)時(shí)間因方案而異。5 到 10 分鐘的試驗(yàn)足以獲得足夠數(shù)量的運(yùn)動(dòng)以進(jìn)行可靠測(cè)量。在這段時(shí)間之后，大多數(shù)老鼠都不太活躍。
最好在隔音室中進(jìn)行此測(cè)試，因?yàn)榇舐暤脑胍魰?huì)分散鼠標(biāo)的注意力。如果無(wú)法做到這一點(diǎn)，請(qǐng)?jiān)陂T(mén)和附近區(qū)域添加一個(gè)顯示“正在進(jìn)行實(shí)驗(yàn)"的標(biāo)志，以消除任何對(duì)話(huà)。?
大多數(shù)研究通常每組使用 8 到 10 只小鼠。
進(jìn)行行為分析的實(shí)驗(yàn)人員不應(yīng)該對(duì)被小鼠可見(jiàn)。
